從世界上最早的轉(zhuǎn)基因作物(煙草)于1983年誕生,到美國孟山都公司轉(zhuǎn)基因食品研制的延熟保鮮轉(zhuǎn)基因西紅柿1994年在美國批準上市,轉(zhuǎn)基因食品的研發(fā)迅猛發(fā)展,產(chǎn)品品種及產(chǎn)量也成倍增長,轉(zhuǎn)基因作為一種新興的生物技術(shù),很多人還不了解,使得轉(zhuǎn)基因食品的安全性成為人們關(guān)注的焦點。
轉(zhuǎn)基因食品的檢測技術(shù)
目前,轉(zhuǎn)基因存在的檢測方法主要有prc(凝合酶鏈反應(yīng))技術(shù)、凝膠電泳測序和elisa(酶聯(lián)免疫法)等,這些方法在食品和醫(yī)藥研究方面都有廣泛的使用,其中以prc技術(shù)最為成熟。該技術(shù)是由美國Centus公司的Karymullis發(fā)明,于1985年由saiki等首次報道,是近年來開發(fā)的體外快速擴增dna技術(shù)。
1988年,r.k.saiki等人又成功地將熱穩(wěn)定taqdna聚合酶應(yīng)用于pcr擴增,是pcr技術(shù)上向?qū)嵱没囊淮瓮黄菩缘倪M展。通過pcr技術(shù)可以簡便快速地從微量生物材料中以體外擴增的方式獲得大量特定的核酸,并且有很高的靈敏度和特異性。pcr既可做定性又可做定量分析,目前大多以定性檢測為主,定性檢測的檢出范圍為百分之0.1。但該項技術(shù)的檢測結(jié)果也有可能與實際不相符合,會出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果(即檢測物質(zhì)本身含有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而未被檢出;或是本身沒有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而檢出有轉(zhuǎn)基因成分)。
由于許多獲得批準的遺傳工程體(gmo)表現(xiàn)出一定的導(dǎo)入基因的性狀,因此,基因檢測也需要以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù),這就出現(xiàn)了elisa法。1971年Engvall和Perlman發(fā)表了有關(guān)酶聯(lián)免疫吸附分析法用于免疫球蛋白g(igg)定量測定的文章,使該技術(shù)發(fā)展成為液體標本中微量物質(zhì)的測定方法。elisa法與pcr法相比具有操作簡單、快速、結(jié)果準確,有高通量的特性,解決了轉(zhuǎn)基因檢測中樣品核酸制備的困難,同時降低了檢測成本和時間高的催化效率,可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的靈敏度和穩(wěn)定性。
但該項技術(shù)主要應(yīng)用于原料和半成品分析,在終產(chǎn)物分析方面靈敏度底于pcr法。另外,該項技術(shù)還需要特殊的抗體和“新”的表達蛋白,而食品中的這類“新”蛋白質(zhì)的含量極低,且在加工過程中蛋白質(zhì)常會發(fā)生變化;該分析法同時還需要熟練的操作技術(shù)。這些因素都使elisa法在轉(zhuǎn)基因檢測應(yīng)用上受到了一定的限制。