轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)及方法

　　從世界上最早的轉(zhuǎn)基因作物（煙草）于1983年誕生，到美國(guó)孟山都公司轉(zhuǎn)基因食品研制的延熟保鮮轉(zhuǎn)基因西紅柿1994年在美國(guó)批準(zhǔn)上市，轉(zhuǎn)基因食品的研發(fā)迅猛發(fā)展，產(chǎn)品品種及產(chǎn)量也成倍增長(zhǎng)，轉(zhuǎn)基因作為一種新興的生物技術(shù)，很多人還不了解，使得轉(zhuǎn)基因食品的安全性成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。

　　轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)技術(shù)

　　目前，轉(zhuǎn)基因存在的檢測(cè)方法主要有prc（凝合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)、凝膠電泳測(cè)序和elisa（酶聯(lián)免疫法）等，這些方法在食品和醫(yī)藥研究方面都有廣泛的使用，其中以prc技術(shù)最為成熟。該技術(shù)是由美國(guó)Centus公司的Karymullis發(fā)明，于1985年由saiki等首次報(bào)道，是近年來(lái)開(kāi)發(fā)的體外快速擴(kuò)增dna技術(shù)。

　　1988年，r.k.saiki等人又成功地將熱穩(wěn)定taqdna聚合酶應(yīng)用于pcr擴(kuò)增，是pcr技術(shù)上向?qū)嵱没�的一次突破性的進(jìn)展。通過(guò)pcr技術(shù)可以簡(jiǎn)便快速地從微量生物材料中以體外擴(kuò)增的方式獲得大量特定的核酸，并且有很高的靈敏度和特異性。pcr既可做定性又可做定量分析，目前大多以定性檢測(cè)為主，定性檢測(cè)的檢出范圍為百分之0.1。但該項(xiàng)技術(shù)的檢測(cè)結(jié)果也有可能與實(shí)際不相符合，會(huì)出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果（即檢測(cè)物質(zhì)本身含有轉(zhuǎn)基因物質(zhì)，而未被檢出；或是本身沒(méi)有轉(zhuǎn)基因物質(zhì)，而檢出有轉(zhuǎn)基因成分）。

　　由于許多獲得批準(zhǔn)的遺傳工程體（gmo）表現(xiàn)出一定的導(dǎo)入基因的性狀，因此，基因檢測(cè)也需要以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)，這就出現(xiàn)了elisa法。1971年Engvall和Perlman發(fā)表了有關(guān)酶聯(lián)免疫吸附分析法用于免疫球蛋白g（igg）定量測(cè)定的文章，使該技術(shù)發(fā)展成為液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。elisa法與pcr法相比具有操作簡(jiǎn)單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，有高通量的特性，解決了轉(zhuǎn)基因檢測(cè)中樣品核酸制備的困難，同時(shí)降低了檢測(cè)成本和時(shí)間高的催化效率，可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度和穩(wěn)定性。

　　但該項(xiàng)技術(shù)主要應(yīng)用于原料和半成品分析，在終產(chǎn)物分析方面靈敏度底于pcr法。另外，該項(xiàng)技術(shù)還需要特殊的抗體和“新”的表達(dá)蛋白，而食品中的這類(lèi)“新”蛋白質(zhì)的含量極低，且在加工過(guò)程中蛋白質(zhì)常會(huì)發(fā)生變化；該分析法同時(shí)還需要熟練的操作技術(shù)。這些因素都使elisa法在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)應(yīng)用上受到了一定的限制。